teorico

CLONACION MOLECULAREl propósito de la clonacion molecular es aislar grandes cantidades de genes específicos purficados.
Para lograr la clonacion hay que sacar el gen de un genoma con ayuda de tecnicas química y enzimologicas que nos proporcionan las enzimas de restricción ,las ligasas y ADN sintético, para cortar y pegar moléculas de ADN in vitro (recombinacion in vitro)

Pasos de la clonacion molecular:
1.- Aislamiento y fragmentación de la fuente de ADN.
a. Aislamiento de ADN a partir de genoma total de un organismo de interés, este es generalmente cortado con enzimas de restricción para obtener una mezcla de fragmentos de ADN.
b. ADN complementario (ADN), sintetizado de una plantilla de ARN con ayuda de la trascriptasa reversa, puede ser obtenido por PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa).
c.- ADN sintetizado in vitro partiendo de nucleotidos sueltos.

2.- Inserción de los fragmentos de ADN a un vector de cloacion con ADN ligasa.Los vectores de clonacion son elementos genéricos pequeños, pero que se replican independientemente, están diseñados genéticamente  para permitir la recombinacion con ADN foráneo en los sitos de cote, de forma que no afecta su replicacion.

3.- Transferencia del gen al organismo que se va modificar, este procedimiento se hace con los vectores obtenidos o con la inserción directa que se puede lograr con un dispositivo llamado pistola de genes en un proceso sencillo y rápido pero con bajas posibilidades de éxito.

4.-Transformación del organismo blanco, algunas células tendrán el gen deseado incorporado a su genoma pero otras no esta mezcla es conocida como biblioteca de genes o biblioteca de ADN.

5.-Selección de los organismos genéticamente modificados (GMO) de los que no se modificaron exitosamente.